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技术服务
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  • RNA凝胶迁移或电泳迁移率实验(RNA-EMSA)

    RNA凝胶迁移或电泳迁移率实验(RNA-EMSA)

    RNA-EMSA(RNA-Electrophoretic Mobility Shift Assay)是一种快速灵敏的检测蛋白-RNA互作的技术方法,RNA-EMSA是将标记的RNA与蛋白质共同孵育,当形成复合物后,通过非变性聚丙烯酰胺凝胶对RNA-蛋白质复合体进行电泳。 与游离的RNA探针相比,RNA-蛋白质复合体的迁移速度较慢,可以在凝胶上观察到阻滞条带。通过RNA-EMSA实验可以检测或验证RNA与蛋白质的相互作用、蛋白质在RNA上的结合序列等。

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  • RNA Pull Down

    RNA Pull Down

    RNA Pull Down是根据已知的RNA序列,设计DNA模板,然后使用体外转录技术合成生物素标记的RNA探针,并与蛋白提取液进行孵育,形成RNA-蛋白质复合体。

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  • 体内RNA亲和纯化(RAP)

    体内RNA亲和纯化(RAP)

    体内RNA亲和纯化(RNA Affinity Purification,RAP)是根据感兴趣的已知RNA序列,设计与RNA序列互补的生物素标记的DNA捕获探针,同时将RNA与蛋白质在体内进行交联,然后使用DNA捕获探针,将与目的RNA结合的复合物沉淀下来,进行LC-MS/MS检测,鉴定出目的RNA的结合蛋白。

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  • RNA免疫共沉淀测序(RIP-seq)

    RNA免疫共沉淀测序(RIP-seq)

    RNA免疫共沉淀测序(RNA Immunoprecipitation Sequencing,RIP-seq)是利用目标蛋白的特异性抗体,将对应的蛋白-RNA复合体进行免疫沉淀,对分离纯化的RNA进行建库与高通量测序。RIP-seq能够鉴定体内目的蛋白结合的RNA,RIP-seq分为天然和交联鉴定两种方式。天然RIP-seq能够直接鉴定与目标蛋白质结合的RNA,以及RNA在样本中的水平(丰度);交联RIP-seq能够鉴定蛋白质和RNA的结合位点。

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  • 体外RNA亲和纯化测序

    体外RNA亲和纯化测序

    体外RNA亲和纯化测序,是通过体外蛋白表达技术,表达纯化出带有标签的RNA结合蛋白(RNA Binding Protein,RBP),然后与富集的mRNA在体外进行孵育结合,分离出所有和RBP结合的mRNA,进行建库与高通量测序,通过生物信息学分析,筛选出与目的RBP结合的mRNA。 体外RNA亲和纯化测序,无需使用特异性抗体,就能够高通量检测与蛋白相互作用的mRNA。

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