双分子荧光互补（Bimo-lecular fluorescence complementation，简称BiFC）技术，可以直观、快速地判断目标蛋白在活细胞中的定位和相互作用。该技术巧妙地将荧光蛋白分割成两个不具有荧光活性的分子片段（N-fragment、C-fragment），再将这两个荧光蛋白的片段分别融合两个目标蛋白A、B，如果A蛋白与B蛋白发生了相互作用，在空间上互相靠近，则两个荧光蛋白的片段就会重新构建成完整的具有活性的荧光蛋白，在激发光的激发下，荧光蛋白发出荧光。反之，若A蛋白与B蛋白之间没有发生相互作用，则不能被激发岀荧光。常用的荧光蛋白是绿色荧光蛋白GFP。