- 技术简介
- 服务流程
- 应用案例
DNA Pull Down是一种新颖的DNA-蛋白互作技术，能够鉴定与特定DNA序列结合的蛋白（转录因子或者DNA结合蛋白）。DNA Pull Down使用生物素标记的DNA探针作为诱饵，与提取的内源细胞核蛋白进行孵育，捕获与DNA探针特异性结合的蛋白（比如转录因子），最终使用蛋白质谱的方法，鉴定出特异性结合的蛋白。
DNA Pull Down的优势在于，探针的设计长度范围广，蛋白保持天然结构，实验周期短，通量高，特异性强，假阳性率低，应用范围广（适用于原核生物与真核生物）。将DNA Pull Down与蛋白质谱结合，又具备高灵敏度的特点。
技术优势
探针长度设计范围广
蛋白提取自新鲜组织和细胞，保持天然构象
特异性强，假阳性率低
适用于真核生物和原核生物
实验周期短，高通量，高灵敏度
技术应用
DNA pull-down主要用于筛选与目的DNA片段互作的蛋白（如转录因子等）。
| 服务流程 |
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| 客户提供 | 样本要求 |
新鲜样本（组织或细胞）； 探针序列； 物种参考基因组信息； | 组织样本：3g 细胞样本：2.7ⅹ107 |
| 交付结果 | 项目周期-工作日 |
1. DNA探针电泳图 2. 探针标记效率结果 3. 核蛋白银染结果 4. DNA pull down银染结果 5. 质谱检测结果 6. DNA Pull Down分析报告 | 探针制备：10天 核蛋白提取：2天 Pull down和银染：3天 质谱分析：20天 合计：35个工作日 |
2022年5月19日，扬州大学园艺与植物保护学院陶俊和赵大球教授团队共同在Plant, Cell & Environment（IF=7.79）杂志上发表了题为“Herbaceous peony AP2/ERF transcription factor binds the promoter of the tryptophan decarboxylase gene to enhance high-temperature stress tolerance”的研究性论文。
PlTDC在P. lactiflora耐高温胁迫中发挥了积极作用，并通过DNA pull-down技术鉴定了其表达受到AP2/ERF转录因子PlTOE3的激活，增强了褪黑激素的产生和高温耐受性。这些结果为研究植物高温胁迫的调控机制提供了新的思路。
