- 技术简介
- 表达案例
E. coli具有遗传背景清晰、细胞增殖快、成本低、表达量高、稳定性好和抗污染能力强等特点，适用于多种蛋白的表达。大肠杆菌蛋白表达系统是目前应用广泛且经济实惠的蛋白表达系统。缺点是该表达系统易形成包涵体，含有内毒素，没有翻译后修饰的加工功能。该系统适用于表达原核来源的蛋白或不需要翻译后修饰的真核来源蛋白，特别是小分子蛋白。
蓝景科信拥有丰富的E. coli蛋白表达纯化经验，熟练运用多种表达宿主菌，提供多种表达载体和标签的选择。
| 原核E.coli蛋白表达服务内容 | |||
| 步骤 | 内容 | 交付内容 | 周期 |
| 密码子优化及基因合成 |
| 1-2周 | |
| 载体构建 |
| 测序结果 | 1-2周 |
| 表达鉴定 |
| 表达评估报告 | 1-2周 |
| 大量表达和纯化 |
| 1-3 mg纯化蛋白，纯度>85% | 1-2周 |
| 工业级表达及纯化（可选） |
| 蛋白纯度鉴定报告 成品蛋白 | 根据表达体积商定 |
引用文献：
任增亮, 堵国成, 陈坚,等. 大肠杆菌高效表达重组蛋白策略[J]. 中国生物工程杂志, 2007, 27(9):103-109.
Rosano G L , Ceccarelli E A . Recombinant protein expression in Escherichia coli: advances and challenges[J]. Frontiers in Microbiology, 2014, 5(172):172.
Baneyx F. Recombinant protein expression in Escherichia coli. Curr Opin Biotechnol. 1999 Oct;10(5):411-21. doi: 10.1016/s0958-1669(99)00003-8. PMID: 10508629.
HAYAT, SEYED MOHAMMAD GHEIBI, FARAHANI, NAJMEH, GOLICHENARI, BEHROUZ, et al. Recombinant Protein Expression in Escherichia coli (E.coli): What We Need to Know[J]. Current pharmaceutical design,2018,24(6):718-725. DOI:10.2174/1381612824666180131121940.
M：Molecular weight marker S：Supernatant of cell lysate P：Precipitation of cell lysate FT：Flow through W1：Wash 1 W2：Wash 2 W3：Wash 3 E：Elution from Ni-NTA |
