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酵母双杂交系统(Y2H)

操作简便

真实性高

敏感性好

适用范围广

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酵母双杂交系统(Yeast two-hybrid system)是将待研究的两种蛋白质A和B的编码DNA序列分别克隆(融合)到酵母表达质粒的转录激活因子(如GAL4等)的DNA结合结构域(B-BD)和转录激活域(A-AD)上,构建成融合表达载体,从表达产物分析两种蛋白质相互作用的系统。

如果A和B蛋白能够相互作用,则DNA结合域和激活域紧密靠近,使转录激活因子起作用,启动报告基因(如b-半乳糖苷酶)的表达,通过检测表达产物可以判断相互作用的强弱。

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