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技术服务
Technical service

DNA Pull Down

探针长度设计范围广

蛋白提取自新鲜组织和细胞,保持天然构象

特异性强,假阳性率低

适用于真核生物和原核生物

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  • 技术简介
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  • 应用案例

DNA Pull Down是一种新颖的DNA-蛋白互作技术,能够鉴定与特定DNA序列结合的蛋白(转录因子或者DNA结合蛋白)。DNA Pull Down使用生物素标记的DNA探针作为诱饵,与提取的内源细胞核蛋白进行孵育,捕获与DNA探针特异性结合的蛋白(比如转录因子),最终使用蛋白质谱的方法,鉴定出特异性结合的蛋白。DNA Pull Down的优势在于,探针的设计长度范围广,蛋白保持天然结构,实验周期短,通量高,特异性强,假阳性率低,应用范围广(适用于原核生物与真核生物)。将DNA Pull Down与蛋白质谱结合,又具备高灵敏度的特点。


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技术优势

  • 探针长度设计范围广

  • 蛋白提取自新鲜组织和细胞,保持天然构象

  • 特异性强,假阳性率低

  • 适用于真核生物和原核生物

  • 实验周期短,高通量,高灵敏度


技术应用

DNA pull-down主要用于筛选与目的DNA片段互作的蛋白(如转录因子等)。

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服务流程
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客户提供样本要求

新鲜样本(组织或细胞);

探针序列;

物种参考基因组信息;

组织样本:3g 

细胞样本:2.7ⅹ107


交付结果项目周期-工作日

1. DNA探针电泳图

2. 探针标记效率结果

3. 核蛋白银染结果

4. DNA pull down银染结果

5. 质谱检测结果

6. DNA Pull Down分析报告

探针制备:10天 

核蛋白提取:2天

Pull down和银染:3天

质谱分析:20天

合计:35个工作日


2022年5月19日,扬州大学园艺与植物保护学院陶俊和赵大球教授团队共同在Plant, Cell & EnvironmentIF=7.79)杂志上发表了题为“Herbaceous peony AP2/ERF transcription factor binds the promoter of the tryptophan decarboxylase gene to enhance high-temperature stress tolerance”的研究性论文。

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PlTDCP. lactiflora耐高温胁迫中发挥了积极作用,并通过DNA pull-down技术鉴定了其表达受到AP2/ERF转录因子PlTOE3的激活,增强了褪黑激素的产生和高温耐受性。这些结果为研究植物高温胁迫的调控机制提供了新的思路。


原文链接:https://doi.org/10.1111/pce.14357

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